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4種常見的免疫檢測技術(shù)

點擊次數(shù):678 更新時間:2015-06-11
 

(一)免疫酶染色試驗 (immunoenzyme staining test,IEST) 免疫酶染色試驗以含寄生蟲病原的組織切片、印片或培養(yǎng)物涂片為固相抗原,當其與待測標本中的特異性抗體結(jié)合后,可再與酶標記的第二抗體反應(yīng)形成酶標記免疫復合物,后者可與酶的相應(yīng)底物作用而出現(xiàn)肉眼或光鏡下可見的呈色反應(yīng)。

(二)皮內(nèi)試驗 (intrader rpmal test,ID) 宿主在病原體刺激后,體內(nèi)產(chǎn)生親細胞性抗體(IgE和IgG4)。當其與相應(yīng)抗原結(jié)合后,肥大細胞和嗜堿性粒細胞脫顆粒,釋放生物活性物質(zhì),引起注射抗原的局部皮膚出現(xiàn)皮丘及紅暈,以此便可判斷體內(nèi)是否某有種特異性抗體存在。

(三)免疫擴散(immunodiffusion)和免疫電泳(immunoelectrophoresis)

1.免疫擴散 于一定條件下,抗原與抗體在瓊脂凝膠中相遇,在二者含量比例合適時形成肉眼可見的白色沉淀。本法有兩種類型:①單相免疫擴散:將一定量的抗體混入瓊脂凝膠中,使抗原溶液在凝膠中擴散而形成沉淀環(huán),其大小與抗原量成正比;②雙相免疫擴散:將抗原與抗體分別置于凝膠板的相對位置,二者可自由擴散并在中間形成沉淀線。用雙相免疫擴散法既可用已知抗原檢測未知抗體,也可用已知抗體檢測未知抗原。

2.免疫電泳 是將免疫擴散與蛋白質(zhì)凝膠電泳相結(jié)合的一項技術(shù)。事先將抗原在凝膠板中電泳,之后在凝膠槽中加入相應(yīng)抗體,抗原和抗體雙相擴散后,在比例合適的位置,產(chǎn)生肉眼可見的弧形沉淀線。

(四)酶聯(lián)免疫吸附試驗 (enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)

vvv 酶聯(lián)免疫吸附試驗原理是將抗原或抗體與底物(酶)結(jié)合,使其保持免疫反應(yīng)和酶的活性。把標記的抗原或抗體與包被于固相載體上的配體結(jié)合,再使之與相應(yīng)的無色底物作用而顯示顏色,根據(jù)顯色深淺程度目測或用酶標儀測定OD值判定結(jié)果。細胞

 
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