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非特異性背景染色的常見(jiàn)問(wèn)題和解決辦法
常見(jiàn)問(wèn)題                                 解決辦法
操作過(guò)程中漂洗不充分           每步步驟后沖洗3次，每次5分鐘

加試劑后切片干燥               防止切片干燥

組織切片折疊                   勿取折疊處觀察染色結(jié)果

組織中所含過(guò)氧化物酶未阻斷     可再配制新鮮3％H20：封閉，孵育時(shí)間延長(zhǎng)

組織中所含內(nèi)源性生物素未封閉   使用阻斷劑阻斷內(nèi)源性生物素

組織抗原 彌散                   組織及時(shí)固定，固定液要符合標(biāo)準(zhǔn)

切片黏附劑過(guò)厚                 重新配制黏附劑涂片

血清蛋白封閉不充分             延長(zhǎng)血清蛋白封閉時(shí)間或再次用2％BSA封閉

染色過(guò)強(qiáng)
染色過(guò)強(qiáng)的常見(jiàn)問(wèn)題和解決辦法
    常見(jiàn)問(wèn)題                                    解決辦法
一抗?jié)舛冗^(guò)高或抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)          降低一抗?jié)舛然蚩s短一抗孵育時(shí)間

孵育溫度過(guò)高，超過(guò)37℃  蛋白                一般室溫20～28℃

生物素化二抗或SABC-POD孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)      縮短孵育時(shí)間

DAB顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或DAB濃度過(guò)高           顯色時(shí)間不能超過(guò)5―10分鐘，以顯微鏡下觀察為準(zhǔn)